Биссвангер Х., Практическая энзимология
серия: Методы в биологии
Бином. Лаборатория знаний, 2018 г., 978-5-94774-940-3
Описание книги
В учебном издании, написанном известным ученым из Германии, рассмотрены теоретические основы энзимологии, применяемых в этой научной области методов, а также приведены описания основополагающих лабораторных работ.
Для студентов-химиков, биохимиков и биологов, специалистов, работающих в исследовательских и промышленных лабораториях, а также для медиков - научных работников.
Поделиться ссылкой на книгу
Содержание книги
Предисловие к русскому изданию
Предисловие
Список сокращений
1 Введение
2 Номенклатура ферментов
3 Ферментативные реакции
3.1Теория ферментативной реакции
3.1.1 Порядок реакции
3.1.1.1 Реакции нулевого порядка
3.1.1.2 Реакции первого порядка
3.1.1.3 Реакции второго и более высокого
порядков
3.2 Уравнение Михаэлиса-Ментен
3.3 Теория ферментативного анализа
3.3.1 Анализ кинетической кривой
3.3.2 Проведение ферментативного анализа
3.3.2.1 Общие замечания
3.3.2.2 рН
3.3.2.3 Ионная сила и буферные растворы
3.3.2.4 Температура
3.3.2.5 Специфические компоненты
3.3.2.6 Концентрация компонентов и
методические замечания
3.3.3Активность фермента
3.3.3.1 Единицы ферментативной активности
3.3.3.2 Коэффициент поглощения
3.3.3.3 Расчет ферментативной активности
3.4Теория сопряженных ферментативных реакций
3.4.1 Две сопряженные реакции
3.4.2 Три сопряженные реакции
3.5Определение концентрации субстрата
3.5.1 Метод конечной точки
3.5.2 Сопряженные ферментативные реакции
3.5.3 Кинетический метод определения
концентрации субстрата
3.5.4 Циклические ферментативные процессы
3.6Методы ферментативного анализа
3.6.1Спектральные методы
3.6.1.1 Фотометрия в УФ/видимом диапазоне
3.6.1.2 Турбидиметрия
3.6.1.3 Флуориметрия
3.6.1.4 Люминометрия
3.6.1.5 Поляриметрия
3.6.2Электрохимические методы
3.6.2.1 рН-метр
3.6.2.2 рН-стат
3.6.2.3 Потенциометрия
3.6.3Реакции, протекающие с выделением или
поглощением
газа
3.6.3.1 Аппарат Варбурга
3.6.3.2 Радиоактивная метка
3.6.3.3 Электроды для определения кислорода
и углекислого газа
3.7 Ферментативный анализ
3.7.1 Общие замечания
3.7.2 Практические аспекты
3.7.3 Буферы и растворы
3.7.3.1 Теоретические аспекты
3.7.3.2 Приготовление буферов
3.7.3.3 Наиболее распространенные буферные
системы и растворы
3.7.3.4 Расчет активности фермента
3.7.4Определение оксидоредуктаз
3.7.4.1 Оптические методы
3.7.4.2 Флуоресцентные методы
3.7.4.3 Алкогольдегидрогеназа
3.7.4.4 Шикиматдегидрогеназа
3.7.4.5 L-Лактатдегидрогеназа
3.7.4.6 Изоцитратдегидрогеназа
3.7.4.7 Глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназа
3.7.4.8 Малатдегидрогеназа
3.7.4.9 Глюкозооксидаза
3.7.4.10 Глицеральдегидфосфатдегидрогеназа
3.7.4.11 Пируват:ферредоксин оксидоредуктаза
3.7.4.12 Глутаматдегидрогеназа
3.7.4.13 Оксидаза L-аминокислот
3.7.4.14 Уриказа
3.7.4.15 Каталаза
3.7.4.16 Пероксидаза
3.7.4.17 Люцифераза
3.7.5Пируватдегидрогеназный комплекс (ПДГК)
3.7.5.1Определение общей активности ПДГК
по восстановлению НАД+
3.7.5.2Определение общей активности ПДГК
с регенерацией НАД+
3.7.5.3 Пируватдегидрогеназа (липоамид)
3.7.5.4 Дигидролипоамидацетилтрансфераза
3.7.5.5 Дигидролипоамид-дегидрогеназа
3.7.6а-Оксоглутаратдегидрогеназный комплекс
(ОГДГК) . .
3.7.6.1Определение общей активности ОГДГК
по восстановлению НАД+
3.7.6.2а-Оксоглутаратдегидрогеназа
3.7.7Трансферазы
3.7.7.1 Синтаза жирных кислот
3.7.7.2 Фосфорилаза а
3.7.7.3 Гексокиназа
3.7.7.4 Пируваткиназа
3.7.7.5 Ацетаткиназа
3.7.7.6 З-Фосфоглицераткиназа
3.7.8Гидролазы
3.7.8.1 Липаза
3.7.8.2 Холинэстераза
3.7.8.3 Ацетилхолинэстераза
3.7.8.4 Щелочная фосфатаза
3.7.8.5 Кислая фосфатаза
3.7.8.6 Рибонуклеаза (панкреатическая)
3.7.8.7 а-Амилаза
3.7.8.8 Глюкоамилаза
3.7.8.9 Лизоцим
3.7.8.10 а-Глюкозидаза
3.7.8.11 Р-Галактозидаза
3.7.8.12 Р-Фруктозидаза
3.7.9
Протеазы
3.7.9.1 Метод Ансона
3.7.9.2 Расщепление казеина
3.7.9.3 Расщепление азоказеина
3.7.9.4 Нингидриновый метод
3.7.9.5 Лейцинаминопептидаза
3.7.9.6 Химотрипсин
3.7.9.7 Пепсин
3.7.9.8 Трипсин
3.7.9.9 Аспарагиназа
3.7.9.10 Уреаза
3.7.9.11 Аденозинтрифосфатаза
3.7.10
Лиазы
3.7.10.1 Пируватдекарбоксилаза
3.7.10.2 Альдолаза
3.7.10.3 Антранилатсинтаза
3.7.10.4 Карбоангидраза
3.7.10.5 Фумараза
3.7.11Изомеразы
3.7.11.1 Ксилозоизомераза (глюкозоизомераза)
3.7.12Определение концентрации
никотинамидных
нуклеотидов с помощью сопряженных
ферментативных реакций
3.7.12.1 Определение концентрации НАДФ(Н)
3.7.12.2 Определение концентрации НАД(Н)
3.8Различные методы
3.8.1Определение концентрации белков
3.8.1.1 Биуретовая реакция
3.8.1.2 Определение концентрации белков
с помощью бицинхониновой кислоты
3.8.1.3 Метод Лоури
3.8.1.4 Определение концентрации белка
с помощью Кумасси (метод Брэдфорд)
3.8.1.5Определение концентрации белка
по поглощению раствора
3.8.1.6 Флуоресцентный анализ
3.8.1.7 Нингидриновый метод
3.8.1.8 Модифицированный нингидриновый метод
без гидролиза образца
3.8.1.9 Определение концентрации белков с
помощью 2-нафтол-1-карбоксиальдегида
3.8.2 Определение концентрации фосфата
3.8.3 Концентрирование растворов ферментов
3.8.3.1 Преципитация
3.8.3.2 Ультрафильтрация и диализ
3.8.3.3 Ультрацентрифугирование
3.8.3.4 Лиофилизация
3.8.3.5 Некоторые другие методы
3.9Иммуноферментный анализ
3.9.1 Неконкурентный твердофазный
иммуноферментный
анализ
3.9.2 Конкурентный твердофазный
иммуноферментный анализ
3.9.3 Методы иммуноферментного анализа и
способы иммобилизации
3.9.3.1 Связывание белков с агарозой,
активированной бромцианом
3.9.3.2 Присоединение диаминогексана
3.9.3.3 Активация целлюлозы периодатом
3.9.3.4 Получение конъюгата белков (антител)
с ферментами (пероксидазой)
3.9.3.5Введение тиогрупп в молекулы антител
или белков
3.9.3.6 Конъюгация р-галактозидазы с
антителами с помощью сложного эфира
3-малеимидобензоил-]Ч-гидроксисукцинимида
3.9.3.7 Конъюгация щелочной фосфатазы с
антителами с помощью глутарового альдегида
3.9.3.8 Перекрестное сшивание белков с помощью
диметилсуберимидата
4Изучение связывания
4.1Необратимое, обратимое, специфическое
и неспецифическое связывание
4.1.1 Общие замечания
4.1.2 Экспериментальные аспекты
4.1.2.1 Количество фермента или макромолекулы
4.1.2.2 Стабильность фермента или
макромолекулы
4.1.2.3 Стабильность лиганда
4.1.2.4 Концентрация компонентов
4.2Анализ связывания с помощью определения
размеров частиц
4.2.1 Ультрафильтрация
4.2.2 Равновесный диализ
4.2.2.1 Связывание индола с бычьим
сывороточным
альбумином
4.2.3 Обработка результатов эксперимента по
изучению связывания
4.2.4 Гель-фильтрация
4.2.5 Ультрацентрифугирование
4.3Спектральные методы
4.3.1Дифференциальная спектроскопия
4.3.1.1 Применение метода дифференциальной
спектроскопии для анализа связывания лигандов с
каталазой
4.3.1.2 Анализ кривой связывания, полученной
спектральным методом
4.3.2Флуоресцентная спектроскопия
4.3.2.1 Связывание АНС с бычьим сывороточным
альбумином
4.4Другие методы анализа связывания
4.4.1 Радиоактивная метка
4.4.2 Отражательная интерференционная
спектроскопия
5Применение ферментов в технологических
процессах
5.1 Принципы иммобилизации ферментов
5.1.1 Адсорбция
5.1.2 Включение в пористую матрицу
5.1.3 Капсулирование
5.1.4 Образование перекрестных сшивок
5.1.5 Ковалентное связывание на твердом
носителе
5.1.5.1 Носители
5.1.5.2 Спейсер
5.2Методы иммобилизации ферментов
5.2.1 Микрокапсулирование в нейлоновые шарики
5.2.2 Включение в полиакриламидный гель
5.2.3 Ковалентная иммобилизация фермента
на поверхности непористого стекла
5.2.4 Иммобилизация на стекле с контролируемым
размером пор
5.2.5 Ковалентная иммобилизация на полиамидной
матрице
5.2.6 О-Алкилирование с помощью
тетрафторбората триэтилоксония
5.2.7 Связывание фермента с аминогруппами после
частичного гидролиза полиамида
5.2.8 Связывание фермента с карбоксильными
группами после частичного гидролиза полиамида
5.2.9 Иммобилизация фермента на полиэфирной
матрице
5.2.10 Иммобилизация с помощью щелочного
гидролиза
и активации тозилхлоридом
5.2.11Щелочной гидролиз и активация
карбонилдиимидазолом
5.3Методы анализа иммобилизованных ферментов
5.3.1 Определение концентрации белка
5.3.2 Определение ферментативной активности
5.3.2.1Модификация оптических методов анализа
для определения активности иммобилизованных
ферментов
5.3.2.2Кофакторы в реакциях с
иммобилизованными
ферментами
5.4Биореакторы
5.4.1 Реактор периодического действия
5.4.2 Мембранный реактор
5.4.3 Реактор с неподвижным слоем
5.4.4 Иммобилизованные клетки
5.5Биосенсоры
5.5.1 Ферментные электроды
5.5.2 Иммунные сенсоры
5.5.3 Другие типы биосенсоров
5.5.4 Биоаффинные сенсоры
5.6Иммобилизованные ферменты в медицине
Приложение
Список ферментов в соответствии с их
международной
классификацией (КФ)
Предметный указатель
Предисловие
Список сокращений
1 Введение
2 Номенклатура ферментов
3 Ферментативные реакции
3.1Теория ферментативной реакции
3.1.1 Порядок реакции
3.1.1.1 Реакции нулевого порядка
3.1.1.2 Реакции первого порядка
3.1.1.3 Реакции второго и более высокого
порядков
3.2 Уравнение Михаэлиса-Ментен
3.3 Теория ферментативного анализа
3.3.1 Анализ кинетической кривой
3.3.2 Проведение ферментативного анализа
3.3.2.1 Общие замечания
3.3.2.2 рН
3.3.2.3 Ионная сила и буферные растворы
3.3.2.4 Температура
3.3.2.5 Специфические компоненты
3.3.2.6 Концентрация компонентов и
методические замечания
3.3.3Активность фермента
3.3.3.1 Единицы ферментативной активности
3.3.3.2 Коэффициент поглощения
3.3.3.3 Расчет ферментативной активности
3.4Теория сопряженных ферментативных реакций
3.4.1 Две сопряженные реакции
3.4.2 Три сопряженные реакции
3.5Определение концентрации субстрата
3.5.1 Метод конечной точки
3.5.2 Сопряженные ферментативные реакции
3.5.3 Кинетический метод определения
концентрации субстрата
3.5.4 Циклические ферментативные процессы
3.6Методы ферментативного анализа
3.6.1Спектральные методы
3.6.1.1 Фотометрия в УФ/видимом диапазоне
3.6.1.2 Турбидиметрия
3.6.1.3 Флуориметрия
3.6.1.4 Люминометрия
3.6.1.5 Поляриметрия
3.6.2Электрохимические методы
3.6.2.1 рН-метр
3.6.2.2 рН-стат
3.6.2.3 Потенциометрия
3.6.3Реакции, протекающие с выделением или
поглощением
газа
3.6.3.1 Аппарат Варбурга
3.6.3.2 Радиоактивная метка
3.6.3.3 Электроды для определения кислорода
и углекислого газа
3.7 Ферментативный анализ
3.7.1 Общие замечания
3.7.2 Практические аспекты
3.7.3 Буферы и растворы
3.7.3.1 Теоретические аспекты
3.7.3.2 Приготовление буферов
3.7.3.3 Наиболее распространенные буферные
системы и растворы
3.7.3.4 Расчет активности фермента
3.7.4Определение оксидоредуктаз
3.7.4.1 Оптические методы
3.7.4.2 Флуоресцентные методы
3.7.4.3 Алкогольдегидрогеназа
3.7.4.4 Шикиматдегидрогеназа
3.7.4.5 L-Лактатдегидрогеназа
3.7.4.6 Изоцитратдегидрогеназа
3.7.4.7 Глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназа
3.7.4.8 Малатдегидрогеназа
3.7.4.9 Глюкозооксидаза
3.7.4.10 Глицеральдегидфосфатдегидрогеназа
3.7.4.11 Пируват:ферредоксин оксидоредуктаза
3.7.4.12 Глутаматдегидрогеназа
3.7.4.13 Оксидаза L-аминокислот
3.7.4.14 Уриказа
3.7.4.15 Каталаза
3.7.4.16 Пероксидаза
3.7.4.17 Люцифераза
3.7.5Пируватдегидрогеназный комплекс (ПДГК)
3.7.5.1Определение общей активности ПДГК
по восстановлению НАД+
3.7.5.2Определение общей активности ПДГК
с регенерацией НАД+
3.7.5.3 Пируватдегидрогеназа (липоамид)
3.7.5.4 Дигидролипоамидацетилтрансфераза
3.7.5.5 Дигидролипоамид-дегидрогеназа
3.7.6а-Оксоглутаратдегидрогеназный комплекс
(ОГДГК) . .
3.7.6.1Определение общей активности ОГДГК
по восстановлению НАД+
3.7.6.2а-Оксоглутаратдегидрогеназа
3.7.7Трансферазы
3.7.7.1 Синтаза жирных кислот
3.7.7.2 Фосфорилаза а
3.7.7.3 Гексокиназа
3.7.7.4 Пируваткиназа
3.7.7.5 Ацетаткиназа
3.7.7.6 З-Фосфоглицераткиназа
3.7.8Гидролазы
3.7.8.1 Липаза
3.7.8.2 Холинэстераза
3.7.8.3 Ацетилхолинэстераза
3.7.8.4 Щелочная фосфатаза
3.7.8.5 Кислая фосфатаза
3.7.8.6 Рибонуклеаза (панкреатическая)
3.7.8.7 а-Амилаза
3.7.8.8 Глюкоамилаза
3.7.8.9 Лизоцим
3.7.8.10 а-Глюкозидаза
3.7.8.11 Р-Галактозидаза
3.7.8.12 Р-Фруктозидаза
3.7.9
Протеазы
3.7.9.1 Метод Ансона
3.7.9.2 Расщепление казеина
3.7.9.3 Расщепление азоказеина
3.7.9.4 Нингидриновый метод
3.7.9.5 Лейцинаминопептидаза
3.7.9.6 Химотрипсин
3.7.9.7 Пепсин
3.7.9.8 Трипсин
3.7.9.9 Аспарагиназа
3.7.9.10 Уреаза
3.7.9.11 Аденозинтрифосфатаза
3.7.10
Лиазы
3.7.10.1 Пируватдекарбоксилаза
3.7.10.2 Альдолаза
3.7.10.3 Антранилатсинтаза
3.7.10.4 Карбоангидраза
3.7.10.5 Фумараза
3.7.11Изомеразы
3.7.11.1 Ксилозоизомераза (глюкозоизомераза)
3.7.12Определение концентрации
никотинамидных
нуклеотидов с помощью сопряженных
ферментативных реакций
3.7.12.1 Определение концентрации НАДФ(Н)
3.7.12.2 Определение концентрации НАД(Н)
3.8Различные методы
3.8.1Определение концентрации белков
3.8.1.1 Биуретовая реакция
3.8.1.2 Определение концентрации белков
с помощью бицинхониновой кислоты
3.8.1.3 Метод Лоури
3.8.1.4 Определение концентрации белка
с помощью Кумасси (метод Брэдфорд)
3.8.1.5Определение концентрации белка
по поглощению раствора
3.8.1.6 Флуоресцентный анализ
3.8.1.7 Нингидриновый метод
3.8.1.8 Модифицированный нингидриновый метод
без гидролиза образца
3.8.1.9 Определение концентрации белков с
помощью 2-нафтол-1-карбоксиальдегида
3.8.2 Определение концентрации фосфата
3.8.3 Концентрирование растворов ферментов
3.8.3.1 Преципитация
3.8.3.2 Ультрафильтрация и диализ
3.8.3.3 Ультрацентрифугирование
3.8.3.4 Лиофилизация
3.8.3.5 Некоторые другие методы
3.9Иммуноферментный анализ
3.9.1 Неконкурентный твердофазный
иммуноферментный
анализ
3.9.2 Конкурентный твердофазный
иммуноферментный анализ
3.9.3 Методы иммуноферментного анализа и
способы иммобилизации
3.9.3.1 Связывание белков с агарозой,
активированной бромцианом
3.9.3.2 Присоединение диаминогексана
3.9.3.3 Активация целлюлозы периодатом
3.9.3.4 Получение конъюгата белков (антител)
с ферментами (пероксидазой)
3.9.3.5Введение тиогрупп в молекулы антител
или белков
3.9.3.6 Конъюгация р-галактозидазы с
антителами с помощью сложного эфира
3-малеимидобензоил-]Ч-гидроксисукцинимида
3.9.3.7 Конъюгация щелочной фосфатазы с
антителами с помощью глутарового альдегида
3.9.3.8 Перекрестное сшивание белков с помощью
диметилсуберимидата
4Изучение связывания
4.1Необратимое, обратимое, специфическое
и неспецифическое связывание
4.1.1 Общие замечания
4.1.2 Экспериментальные аспекты
4.1.2.1 Количество фермента или макромолекулы
4.1.2.2 Стабильность фермента или
макромолекулы
4.1.2.3 Стабильность лиганда
4.1.2.4 Концентрация компонентов
4.2Анализ связывания с помощью определения
размеров частиц
4.2.1 Ультрафильтрация
4.2.2 Равновесный диализ
4.2.2.1 Связывание индола с бычьим
сывороточным
альбумином
4.2.3 Обработка результатов эксперимента по
изучению связывания
4.2.4 Гель-фильтрация
4.2.5 Ультрацентрифугирование
4.3Спектральные методы
4.3.1Дифференциальная спектроскопия
4.3.1.1 Применение метода дифференциальной
спектроскопии для анализа связывания лигандов с
каталазой
4.3.1.2 Анализ кривой связывания, полученной
спектральным методом
4.3.2Флуоресцентная спектроскопия
4.3.2.1 Связывание АНС с бычьим сывороточным
альбумином
4.4Другие методы анализа связывания
4.4.1 Радиоактивная метка
4.4.2 Отражательная интерференционная
спектроскопия
5Применение ферментов в технологических
процессах
5.1 Принципы иммобилизации ферментов
5.1.1 Адсорбция
5.1.2 Включение в пористую матрицу
5.1.3 Капсулирование
5.1.4 Образование перекрестных сшивок
5.1.5 Ковалентное связывание на твердом
носителе
5.1.5.1 Носители
5.1.5.2 Спейсер
5.2Методы иммобилизации ферментов
5.2.1 Микрокапсулирование в нейлоновые шарики
5.2.2 Включение в полиакриламидный гель
5.2.3 Ковалентная иммобилизация фермента
на поверхности непористого стекла
5.2.4 Иммобилизация на стекле с контролируемым
размером пор
5.2.5 Ковалентная иммобилизация на полиамидной
матрице
5.2.6 О-Алкилирование с помощью
тетрафторбората триэтилоксония
5.2.7 Связывание фермента с аминогруппами после
частичного гидролиза полиамида
5.2.8 Связывание фермента с карбоксильными
группами после частичного гидролиза полиамида
5.2.9 Иммобилизация фермента на полиэфирной
матрице
5.2.10 Иммобилизация с помощью щелочного
гидролиза
и активации тозилхлоридом
5.2.11Щелочной гидролиз и активация
карбонилдиимидазолом
5.3Методы анализа иммобилизованных ферментов
5.3.1 Определение концентрации белка
5.3.2 Определение ферментативной активности
5.3.2.1Модификация оптических методов анализа
для определения активности иммобилизованных
ферментов
5.3.2.2Кофакторы в реакциях с
иммобилизованными
ферментами
5.4Биореакторы
5.4.1 Реактор периодического действия
5.4.2 Мембранный реактор
5.4.3 Реактор с неподвижным слоем
5.4.4 Иммобилизованные клетки
5.5Биосенсоры
5.5.1 Ферментные электроды
5.5.2 Иммунные сенсоры
5.5.3 Другие типы биосенсоров
5.5.4 Биоаффинные сенсоры
5.6Иммобилизованные ферменты в медицине
Приложение
Список ферментов в соответствии с их
международной
классификацией (КФ)
Предметный указатель
Об авторе
Последние поступления в рубрике "Тематика определяется"
 |
Коллекционное холодное оружие Западной Европы XVII - начала XIX вв.
Издание посвящено уникальным образцам охотничьего и боевого холодного оружия из частных собраний европейских коллекционеров. Каждый экземпляр сопровождается экспертным описанием, оценкой степени его сохранности и подробными авторскими иллюстрациями.... |
|
Терапевтическая катастрофа. Мастера психотерапии рассказывают о самых провальных случаях
Ни один психотерапевт не застрахован от ошибок в работе с клиентами, но мало кто готов открыто обсуждать собственные неудачи. Авторы книги решили наглядно показать, что просчеты и промахи - это не только неотъемлемая сторона профессии, но и повод вынести для себя ценные уроки.... |
|
Любовь к человеку с пограничным расстройством личности
Люди с пограничным расстройством личности (ПРЛ) могут быть очень заботливыми, нежными, умными и веселыми - и при этом своим поведением отталкивать даже самых близких людей. Если у вас непростые отношения с человеком, который страдает от ПРЛ, то эта книга - для вас.... |
Если Вы задавались вопросами "где найти книгу в интернете?", "где купить книгу?" и "в каком книжном интернет-магазине нужная книга стоит дешевле?", то наш сайт именно для Вас. На сайте книжной поисковой системы Книгопоиск Вы можете узнать наличие книги Биссвангер Х., Практическая энзимология в интернет-магазинах. Также Вы можете перейти на страницу понравившегося интернет-магазина и купить книгу на сайте магазина. Учтите, что стоимость товара и его наличие в нашей поисковой системе и на сайте интернет-магазина книг может отличаться, в виду задержки обновления информации.
